1、不能与碱性或酸性药物混用。与碳酸氢钠、人工盐等碱性药物混用，氯霉素会因被破坏而失效。青霉素、链霉素、葡萄糖酸钙、盐酸普鲁卡因等酸性药物与氯霉素混用可发生沉淀，造成肌肉注射吸收不良，静脉注射则栓塞血管，严重的会危及生命。
2、不能与收敛、吸附药物混用。如高岭土、鞣酸、鞣酸蛋白、药用炭等能吸附氯霉素，降低疗效。
3、不能静脉注射。
4、不能对仔畜禽用高量。
5、不能给成年反刍兽口服。
6、不能给犬多次使用和用量过大，否则容易引起再生障碍性贫血和溶血性贫血。
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