为尽早发现ASF疫情，首先要让猪场全体员工熟悉ASF的临床症状。了解周边三公里范围内的养猪场户、屠宰场点、生猪交易场所、无害化处理场等情况，密切关注周边生猪异常死亡情况，及时发现疫情隐患。

时刻关注本猪场各个环节的猪只异常情况，包括猪只的精神状态、采食情况、体温变化、体表变化和经产母猪表现等。一旦发现可疑症状，第一时间采样送检(采样优先顺序：鼻腔拭子>唾液>阴门拭子>肛门拭子)。

精神状态：及时发现栏舍内眼神异常猪只(这时猪只可能还未排毒)、精神沉郁的猪只，并及时采样和送检。猪场要积极发动一线员工关注异常猪只，对于提前发现猪只异常并及时采样经实验室检测阳性的，给予相应奖励。

采食情况：关注群体和个猪只的采食情况，对于采食量稍微减少(排除饲料因素)，要尽快采样送检。采食量明显下降的猪只一般会伴随着体温升高。

体温变化：正常保育猪、育肥猪体温一般在39℃-40℃之间;正常成年基础猪群的体温在38℃-39℃之间(其中母猪发情、分娩前后几天，体温会升到39℃-40℃之间)。如果发现体温超过正常范围的猪只，应及时采样送检。为了防止测量体温时交叉污染，体温计必须一猪一换，须戴手套和穿防护服;可采用远红外体温计测温，尽量不入栏。

体表变化：看到皮肤发红猪只，表明猪只处于发烧状态。另外，有些猪只打针时出现凝血不良。对于这些异常猪只，要及时采样进行检测。

经产母猪的表现：经产母猪除上述临床表现外，还会出现流产。ASF造成流产有别于其他疫病常见的黑胎或白胎，会出现胎儿均质发红。

快速精准检测为实现快速准确检测，ASF样品采集非常关键。当疫情暴发(被动监测)时，应针对患病猪、死亡猪及猪舍环境进行采样;而在常规监测时，应对ASFV易感猪群及环境(如出猪台、场区大门等风险较大的地方)进行采样;如果是针对处于精准清除的群体，采样的数量可以适当加大。采样应注意避免交叉污染，并在采集每头猪只后更换一次性手套。触碰猪只、料槽、栏杆后，及时更换一次性手套。采血时，必须做到每采集1头猪只更换1个新的针头，以免造成ASFV传播。提交到诊断实验室的相关样品应有清晰且保存持久的标签，样品质量良好。所有采样后的防护用品焚烧或高压处理。

(1)疑似发病猪场采样

采样工作准备：准备长的棉签(15厘米以上)、医用纱布、自封袋、一次性注射器、防护服、一次性长臂手套、鞋套、大的塑料袋(或塑料布，用于包裹病死猪)、记号笔、记录纸、笔、甲醛溶液、Eppendorf管、拉链式自封袋、垃圾袋、录像机(手机)、手电筒、拖布、消毒药、火焰喷枪等。

样品类型：

①疑似猪只口鼻拭子。将每头猪口、鼻拭子收集于同一采样管中，以便提高检测的准确性和减少工作量。拭子装于Eppendorf管内，建议将样品保存于4℃，立刻送检，没有实验条件的应在24小时内送至有资质的实验室。

②病死动物的腹股沟淋巴结。突然死亡的猪只，由于血液及脏器中携带大量的病毒，建议仅采集腹股沟淋巴结，然后将病死猪包裹后进行无害化处理。

③全血。用含有EDTA抗凝血剂的真空采血管，从颈静脉、前腔静脉或耳静脉抽取全血。如果猪只已经死亡，可以立即从心脏采血。不宜使用肝素作为抗凝剂，因其可以抑制PCR反应而造成假阴性。

偏远地区或者在无法冷链运输的时候，可经干血斑(DBS)进行微量血液样品的采集和储存。将几滴由刺血针或无菌注射器针头从动物的静脉或皮肤滴加到特制的吸水滤纸中完成干血斑(DBS)样品的收集。血液样品应完全浸透滤纸，并风干数小时。将样品储存在低透气性的塑料袋中，加入干燥剂以减少湿度。

④血清。使用未加抗凝剂的真空采血管从颈静脉、前腔静脉、耳缘静脉，或剖检过程收集血液样品。

⑤器官和组织样品。不推荐进行剖检采样，因易造成ASFV的扩散。必须在保障生物安全的条件下进行剖检，所有的猪器官和组织均可用于检测ASFV，但脾脏、淋巴结、肝脏、扁桃体、心脏、肺、肾脏及骨髓等含毒量较高。

⑥软蜱等媒介样品。钝缘蜱可以用于检测ASFV。有三种收集技术：手动收集、二氧化碳诱捕和真空吸引捕捉。收集后，应让蜱保持存活或直接储存在液氮中，避免DNA降解。

⑦环境样品。以区块为单位，对风险等级进行区域采样。如猪场内所有墙体、地面、设备等表面进行全覆盖采样。

生产区内：包括各区间猪舍内所有区间单元墙体、地面、风机、地沟、设备、水线、料线等。采样应全覆盖包括死角、料槽底部等不易采集到的位置。

生产区外：对可能的风险区域进行采样，包括出猪台、场区大门、料塔、下水道、员工宿舍、储物间、浴室、办公室、餐厅厨房、车辆、水源等所有可能受到污染的区域。

(2)包装和运输样品

采集好的样品应仔细进行包装，做好标记并送到实验室。运送的样品必须有足够数量的冷却材料(如冰袋、干冰)，避免变质。样品应使用“三重包装系统”，保障运输过程中的生物安全，并避免样品受到污染。样品运输必须遵守农业农村部《高致病性动物病原微生物菌(毒)种运输包装规范》等规定。

(3)废弃物处理

采样结束后，做好尸体、场地、物品、个人防护用品的消毒和无害化处理。对不同场点尽量安排不同的采样人员，避免交叉污染。

(4)快速精准检测

实时荧光定量PCR(qPCR)是实验室快速检测ASFV的常用方法。大型养猪企业可建设ASFV检测实验室，当猪场周边和自己猪场受到威胁时做好疫情排查与监测，为疫情处置和精准清除提供技术支撑。开展qPCR检测必须配备专用的实时荧光PCR仪和相应检测试剂。实验室可以根据技术标准开展ASFV的qPCR检测。由于qPCR检测技术灵敏，极其微量的污染即可造成假阳性，对PCR实验室进行分区管理可以避免检测污染。应根据条件将PCR实验室分为试剂准备区、样本制备区、产物扩增区等。

(5)疫情确诊

中国动物卫生与流行病学中心或省级动物疫病预防控制中心实验室可以按要求确诊ASF疫情。